ELISA試劑盒運(yùn)用的基本原理就是將抗原抗體固定到特定的載體上進(jìn)行反應(yīng)，并通過酶催化底物發(fā)生化學(xué)變化，將抗原抗體反應(yīng)通過顏色的辦法顯現(xiàn)出來。固相吸附蛋白對(duì)錯(cuò)特異性的，在包被目的免疫蛋白后，未吸附蛋白的固相表面依然有吸附其它蛋白的才華，為了確?？乖贵w反應(yīng)的特異性，因而被剩余的固相表面應(yīng)該用抗原抗體反應(yīng)無關(guān)蛋白封閉，也可用脫脂奶粉、明膠、牛血清代替。酶可以通過共價(jià)鍵與抗原或抗體銜接構(gòu)成結(jié)合物，當(dāng)抗原抗體反應(yīng)的時(shí)分，被檢測(cè)靶方針中也結(jié)合了酶分子。
 

　　ELISA試劑盒的代測(cè)方法：
 

　　一、間接法：此測(cè)定辦法與直接法相似，不一樣在于級(jí)抗體沒有酶符號(hào)，改用酶符號(hào)的二級(jí)抗體去辨識(shí)一抗體來測(cè)定抗原量。
 

　　優(yōu)勢(shì)：二抗能夠加強(qiáng)信號(hào)，并且有多種挑選能做不一樣的測(cè)定剖析，不加酶符號(hào)的一抗體則能保存它zui多的免疫反響性。
 

　　缺陷：交互反響發(fā)作的機(jī)率較高。
 

　　二、直接法：將抗原直接固定在固相載體上，參加酶符號(hào)的一抗體，即可測(cè)定抗原總量，此一抗體的特異性非常重要。
 

　　優(yōu)勢(shì)：操作手續(xù)簡(jiǎn)略，因無須運(yùn)用二抗可防止交互反響。
 

　　缺陷：實(shí)驗(yàn)中的一抗都得用酶符號(hào)，但不是每種抗體都適合做符號(hào)，費(fèi)用相對(duì)進(jìn)步。
 

　　三、雙抗體夾心法
 

　　優(yōu)勢(shì)：高活路，高專一性，抗原無須事前純化。
 

　　缺陷：抗原必定得具有兩個(gè)以上的抗體部位。